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    PKR的dsRBD能够与5′端三磷酸 的单链RNA结合并引起PKR的活化，但其研究并没 有排除这种结合是否有链接区的参与 。MAYO 等最新研究认为，PKR与单链RNA的结合是由于 链接区有一段富含碱性氨基酸的 Basic Region 的作 用。富含碱性氨基酸的区域带较多正电荷，能够与 单链 RNA 带负电荷的磷酸基团结合，并由此促进 KD的二聚化和活化。Taq DNA 聚合酶、Prime⁃ star DNA 聚合酶、dNTP、限制性内切酶（Xho I 和 EcoR I）、DL2000 Marker 购于 TaKaRa 公司；琼脂糖 （Agarose）、无水乙醇、异丙醇、DEPC（焦碳酸二乙 酯）均购于上海生工生物工程有限责任公司。RNA 提取试剂盒和反转录试剂盒均购于 TaKaRa 公司。 美国ABI公司PCR仪、美国Thermo公司微型高速离 心 机 、上 海 博 迅 立 式 压 力 蒸 汽 灭 菌 器（XQ-LS100G）、苏州净化超净工作台（SW-CJ-ED）、杭州奥 盛三联多用途金属浴、上海天能EPS300电泳仪等。

    在斑马鱼基因组内，虽然同时存在等位基因 ZPKRa（基因登录号：AM421526. 1）和 ZPKRb（基因 登录号：AM421527. 1），但两者的核苷酸序列相差很 小，氨基酸序列则只有5个氨基酸的差异，且都不在 关键的位点 。除此之外，本研究发现斑马鱼细胞 内 还 同 时 存 在 ZPKR 和 ZPKRV（基 因 登 录 号 ： MH425504. 1）两种不同结构的PKR的表达，ZPKRV 仅仅在链接区缺失28个氨基酸残基，其中包含缺失 链接区内的功能模体碱性区。斑马鱼体内这2种PKR的转 录表达，其翻译表达的产物将在刺激后24 h共存于细 胞内，通过显性的负效应，可能减弱其PKR上调后对 蛋白翻译的抑制作用。事实上，qPCR结果显示， 在Poly I：C刺激后的24 h，ZPKRV表达达到峰值，并 且 ZPKR和 ZPKRV的比值最小，为 3. 08。这时两者 的相互作用产生的显性负效应最大，对蛋白翻译抑制 作用最小。