干燥箱的应用-灌注损伤的作用机制分析

    川陈皮素是柑橘皮中一种常见的多甲氧 基黄酮，具有抗氧化、抗炎等作用，常用于治疗哮 喘、结肠炎、阿尔茨海默病、缺血性脑卒中等疾病。 川陈皮素能够保护心肌缺血再灌注、脓毒症小鼠肝 损伤。分光光度计（郑州宏朗仪器设备有限公司），鼓风干燥箱GZX-90770MBE(上海博迅),酶 标仪、显微镜（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）； 透射电子显微镜（TEM，日本电子株式会社）；荧 光显微镜（日本 Olympus 有限公司）。SD 大鼠随机分为对照组、 模型组和川陈皮素（10 mg/kg）组，每组 10 只。大 鼠禁食 12 h，自由饮水，模型组和川陈皮素组大鼠 ip 氯胺酮（25 mg/kg）麻醉，打开腹腔，充分暴露 肝门，用非创伤性血管钳夹闭肝蒂的左、中支，当 肝脏颜色从鲜红色变为深紫色时，缺血 45 min，然 后取下夹子进行肝脏血液再灌注；对照组大鼠仅打 开腹腔，暴露肝门。川陈皮素溶于含 0.5%聚山梨酯 80 的生理盐水中，配制成质量浓度为 10 mg/mL 的 溶液，造模前 30 min 川陈皮素组 ip 川陈皮素，对 照组和模型组 ip 等体积含 0.5%聚山梨酯 80 的生理 盐水。HIRI 6 h 后肝功能发生明显损害，大鼠脱 颈椎处死，取血和肝组织。

    川陈皮素对大鼠缺血后氧化应激的 产生具有一定的疗效；川陈皮素对神经细胞氧化 损伤具有保护作用。本研究结果显示，川陈皮素 可减少 H2O2 诱导的 BRL 细胞中自噬蛋白与线粒体 的共定位数量，表明川陈皮素可以逆转氧化损伤后 线粒体产生的变化。本研究采用自噬抑制剂 3-MA 和自噬诱导剂雷帕霉素，验证川陈皮素是否通过调 控线粒体自噬过程保护肝细胞，发现川陈皮素可改 善 BRL 细胞氧化损伤，雷帕霉素可抑制川陈皮素对 BRL细胞氧化损伤的改善作用，3-MA（1、5 mmol/L） 可增强川陈皮素对 BRL 细胞氧化损伤的改善作用， 3-MA（10 mmol/L）抑制川陈皮素对 BRL 细胞氧化 损伤的改善作用。