以该酵母为出发菌株,采用 Step-by-step 单因素试验及正交试验优化其在有氧条件下高产 乙醇的发酵条件, 并研究其在高粱浸出液培养基 中的产香特性, 探索其在液态发酵模式下酿造白 酒的应用潜力。高压蒸汽灭菌器(YXQ-LS-18SI),上海博 迅实业有限公司医疗设备厂; 生物洁净工作台 (BCN-1360), 北京东联哈尔仪器制造有限公司; 恒温恒湿培养箱(LHS-100CL),上海一恒仪器设 备有限公司;紫外-可见分光光度计(TU-19),北 京普析通用仪器有限责任公司;离心机(Microfuge 2R),北京田林恒泰科技有限公司;高效液相色谱 仪(1260series),Agilent 科技有限公司;三重四极 杆气质联用仪 (TSQTM8000 evo), 美国 Thermo Fisher Scientific。菌体活化阶段方法 按照上述最优培养基配方配制 乙醇发酵培养基, 分别调节初始 pH 值为 (原始 pH,2,3,4,5,6,7,8,9,10),其它条件选择 1.2.4.4 节筛选的最优条件。
酵母一般属于兼性厌氧菌,在有氧条件下生长 较好,然而从产乙醇角度来讲,有氧条件不利于其 进行无氧呼吸发酵产乙醇。 其实,在一定氧气含量 条件下,因有利于前期酵母细胞的积累,从而对发 酵产乙醇有积极作用,随着细胞数量的增加,虽然 提供氧气的条件未发生变化, 但因大量的细胞耗 氧量增加,从而为后期无氧呼吸产乙醇创造条件。酵母 Y3401 不仅在静置培养方 式下发酵产乙醇, 在摇动培养条件下也能高产乙 醇,并且在培养 24 h 时,即使高转速摇动发酵所 产乙醇含量也高于静置, 这可能是高浓度菌密度 的优势。酵母 Y3401 能产生少量异丁醇、 正戊醇、异戊醇和糠醇等高级醇,这些高级醇在合 理浓度范围内有助于白酒的醇甜, 同时也是白酒 中重要的助香剂和关键风味物质(如乙酸异丁酯、 乙酸异戊酯、乙酸糠酯等)的前驱物质。 酵母 Y3401 发酵所产的 2,3-丁二醇是白酒甜感的重 要风味物质,能够增强白酒的甜味;该酵母发酵 高粱浸出液还能产生多种保健功效的醇类风味物 质,如具有木香味的芳樟醇,花香的 α-松油醇,柠 檬香的香叶醇,兼具玫瑰和苹果香的反式-橙花叔 醇。