蒸汽灭菌器用于非编码区多态性研究

    二者基因的多态 性与CRC的易感性也密切相。因此，本研究拟 通过在中国东北地区汉族人群中开展病例对照研 究，探讨中国汉族人群中 ERCC1 rs3212986、ERCC1 rs735482、ERCC1 rs2336219、CD3EAP rs1007616和 PPP1R13L rs6966多态性位点与CRC发病风险之间 的关联，为寻找CRC易感性生物标志提供理论依据 和科学线索。DNA提取试剂盒（北京天根生 化技术有限公司）；SNP基因探针及引物合成（美国 应用生物系统公司）；LightCycler® 480 Probes Master 试剂（瑞士Roche公司）。Nanodrop核酸定量分析仪 （美国ThermoFisher Scientific公司）；实时荧光定量 PCR 仪（瑞士Roche公司）；低温超速离心机（美国 Beckman公司）；CF15D低温高速离心机（日本Hitachi 公司）；YXQ-50SII立式压力蒸汽灭菌器（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）。

    根据年龄分布的特点，病例组和 对照组的平均年龄分别为62.18岁和61.59岁，因此 以60岁作为分层点，将研究对象分为<60岁和≥ 60 岁2层，在年龄<60岁人群中，相关性分析未发现SNP 位点与CRC之间的关联；而在年龄≥ 60岁人群中， ERCC1 rs3212986位点的AA基因型患CRC的风险增 高（OR = 7.48，95%CI：1.63~34.3），其 余SNP位 点 未 发现这种关联。ERCC1 rs3212986位点位于ERCC1与CD3EAP的 重叠区域，即同时位于ERCC1的3’UTR和CD3EAP 的编码区。因此，ERCC1 rs3212986位点的SNP既可以 通过影响CD3EAP编码区的基因表达，导致CD3EAP 转录翻译后生成的氨基酸不同，产生的蛋白质功能 出现改变，从而影响细胞增殖，又可以影响ERCC1 mRNA的二级结构，导致其与miRNA的结合能力 发生改变，影响miRNA的调控能力，最终导致机体 DNA修复能力出现差异，从而影响某些疾病的发生 发展。此外，本研究还发现包含该等位基因的单体 型及多态性区域CRC的患病风险升高，也提示了该 位点在CRC易感性中的重要性。