不同原理培养箱对大肠埃希菌生长的影响

试剂与材料

大肠埃希菌 标 准 菌 株 （ATCC25922）；营 养 琼 脂（170103）；乳糖蛋白胨培养基（170517）；灭菌生理盐水（201702140）。

 方法

1 .菌种的活化

将冻藏的大肠埃希菌标准菌株磁珠用接种环取出， 用接种环把大肠埃希菌标准菌株磁珠在营养琼脂 平 板 上 分 区 划 线 。 把 划 线 的 营 养 琼 脂 平 板 放 入（37±0.5）°C培养箱培养 24 h

2. 菌液的制备以及菌落的计数

挑取菌落到 1 mL 灭菌磷酸缓冲液中，制成 1 麦氏比浊度的菌悬液。 从菌悬液中吸取 0.5~4.5 mL 灭菌生理盐水中，制成 1∶10 的稀释液，然后逐一 10 倍稀释到 10 -7 麦氏比浊度。 取 10 -7 麦氏比浊度的稀释液采用多管发酵法完成实验。 取样量分别为 1 mL、0.1 mL、0.01 mL。 每次试验做 3 份多管发酵法试验，共做 7 次。 每次试验的 3 份多管发酵法试验分别放入 隔 水 式 培 养 箱 、 电 热 培 养 箱 、 生 化 培 养 箱 中 ，44.5°C培养 24 h。 同时吸取 10 -7 麦氏比浊度的稀释液 2 mL，分别于 2 个平皿各 1 mL，每个平皿倾注约15 mL 已融化并冷却到约 45°C的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使稀释液与培养基充分混匀，待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于 44.5°C培养内培养 48 h，进行菌落计数，共做 7 次。

3.温度的记录

从早上开始上班时记录不同培养箱的的温度，每隔 1 h 记录一次。

 精密度分析

种培养箱的各个时间段的温度见表 1 和图 1；在 7 次 试 验 中 ， 用 得 到 的 大 肠 埃 希 菌 最 大 或 然 数（MPN 数）做精密度分析。 结果见表 2。 从表 1、表 2和图 1 来看，隔水式培养箱的温度波动范围小，结果
值的相对标准偏差（RSD）为 11.4%，相对稳定；电热式 培 养 的 温 度 波 动 范 围 大 ， 结 果 值 的 RSD 为24.3%，相 对 较 大 ；生 化 培 养 箱 的 温 度 波 动 范 围 大 ，结果值的 RSD 为 15.7%，相对较大。

t 检验分析

在 7 次试验中，用得到的大肠埃希菌 MPN 值与平皿的菌落数相比做 t 检验分析。 结果见表 3。 从表3 可知，隔水式培养箱培养大肠埃希菌的 MPN 值与平皿菌落总数相比较，差异无统计学意义（t=1.807，P＞0.05）（t 为样品平均数与总体平均数的离差统计量；P 为假设两组比较无差异的概率）； 电热式培养箱和生化培养箱培养大肠埃希菌的 MPN 值与平皿菌 落 总 数 相 比 较 ， 差 异 有 统 计 学 意 义 （t=2.700、5.004，P＜0.05）。