脉动真空菌器对防护服的灭菌效果

压力蒸汽灭菌器是实验室生物安全的关键防护设备之一。 其中，脉动真空灭菌器利用机械抽真空的原理，使灭菌器内形成负压，蒸汽得以迅速穿透物品内部，利用蒸汽释放的潜热灭菌 。 因其具有蒸汽穿透力强、灭菌效果可靠、灭菌时间短等优点，被生物安全三级实验室广泛使用。 但是在实际工作中，由于包装不同、装载量不同、排空方式不同，灭菌效果存在较大差异。 本试验针对前期存在的防护服灭菌不合格的情况调整灭菌程序，并综合运用物理、化学、生物监测法对新改的灭菌程序的有效性进行评价。

材料与方法

材料脉动真空灭菌器（上海博迅脉动真空灭菌器，设定压力为相对压力）；７件医用一次性防护服（邦维高科Ｓ８）；灭菌袋（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ０１⁃８２８Ｄ，聚丙烯材质）；不锈钢网状球（直径１０.８ｃｍ）；包内化学指示卡（３Ｍ１２４３Ａ）；生物指示物（福泽爱斯Ｈ３７２３Ｔ）。电热恒温培养箱（博迅ＨＰＸ⁃９１６２ＭＢＥ）；温度压力测定仪（意大利ＴＥＣＮＯＳＯＦＴ，所测压力为绝对压力）。１.２方法取７件新的防护服，抖开后，依次放入灭菌袋，将包内化学指示卡、生物指示物和温度压力探头放入不锈钢网状球，然后将不锈钢网状球裹在最中间的那件防护服里面。将灭菌袋的袋口扎起来，并留出直径约２ｃｍ的小孔，放入灭菌器。此外，灭菌器内裸露放置包内化学指示卡、生物指示物和温度压力探头作为对照。分别运行调整前和调整后的灭菌程序。调整前的灭菌程序：排空３次（上限８０ｋＰａ、下限０ｋＰａ）、温度１３２℃、时间１０ｍｉｎ。调整后的灭菌程序：脉动３次（上限８０ｋＰａ、下限－８０ｋＰａ）、温度１３２℃、时间１０ｍｉｎ。程序运行结束后，撕开或用刀剖开防护服，取出指示物和温度压力探头。观察包内化学指示卡黑色条带的爬行情况，若黑色条带爬至“ＡＣＣＥＰＴ”区域，则灭菌合格；反之，则灭菌失败。挤破生物指示物内含的安瓿，培养液浸润菌片，５６℃培养４８ｈ，若培养液保持紫色，则灭菌合格；若培养液变黄，则灭菌失败。只有２种指示物都指示合格，才能判定灭菌合格。此外，读取温度压力探头的记录数据，分析温度、压力的变化情况。