应用生物指示剂验证蒸汽灭菌器的实验目的

为验证蒸汽灭菌器的灭菌效果——我们设计了对照实验 ：实验组生物指示剂和待灭菌物品在121°C下灭菌 15 min，对照组生物指示剂没有进行灭菌处理。然后，将实验组生物指示剂和对照组生物指示剂放在 60°C培养箱中分别培养 48 h 后，发现实验组安瓿的内容物呈紫红色且澄清 ；对照组安瓿的内容物呈橘黄色且浑浊。这证明蒸汽灭菌器的灭菌过程有效，可杀灭孢子菌。

药品质量管理规范（2010 年 修订）》中将验证定义为：证明任何操作规程（或方法 )、生产工艺或系统能够达到预期结果的一系列活动。并提到企业的厂房、设施、设备和检验仪器应当经过确认，应当采用经过验证的生产工艺、操作规程和检验方法进行生产、操作和检验，并保持持续的验证状态。

中华人民共和国药典（2020年 版 四 部 ）中将生物指示剂定义为：一种对特定灭菌程序有确定及稳定耐受性的特殊活微生 物 制 成 品［2］。 并提到湿热灭菌 121°C的生物指示剂通常选择嗜热脂肪地芽孢杆菌，且芽孢数范围在1.0×10 5 ～ 5.0×10 6，D 值 为 1.5 ～ 3 min， 存 活 时 间在 4.5 ～ 14 min， 杀灭时间在13.5 ～ 32.0 min。《中华人民共和国药典（2020年版 四部）》中将湿热灭菌法定义为：将物品置于灭菌设备内利用饱和蒸汽、蒸汽 - 空气混合物、蒸汽 -空气 - 水混合物、过热水等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。

实验目的

为 了 验 证 微 生 物 检 验 过 程中所用物品经灭菌后能否达到无菌状态，本实验以公司化验室蒸汽灭菌器能否杀灭孢子菌为判
断依据进行实验。首先，将生物指 示 剂 和 待 灭 菌 物 品 一 同 置 于蒸 汽 灭 菌 器 中， 在 121 °C 下 灭 菌15 min。然后，把生物指示剂放在 60°C培养箱中培养 48 h。最后，如果安瓿的内容物呈紫红色且澄清，则证明公司蒸汽灭菌器的灭菌过程有效，可杀灭孢子菌；如果安瓿的内容物呈橘黄色且浑浊，则证明公司蒸汽灭菌器的灭菌过程失效，不能杀灭孢子菌。灭菌过程失效会导致因检验物品引入微生物，造成假阳性的风险。